Étapes spécifiques pour extraire la chlorophylle par fragmentation cellulaire à l’aide d’un broyeur de cellules à ultrasons

Le broyeur de cellules à ultrasons utilise l'effet de dispersion des ultrasons dans le liquide pour créer une cavitation, brisant ainsi les particules solides ou les tissus cellulaires dans le liquide.
Le développement de l'industrie biologique a augmenté les exigences en matière d'expériences utilisant des pulvérisateurs de cellules à ultrasons, telles que la mesure et le contrôle de la température des échantillons, l'amélioration du niveau d'intelligence des échantillons refroidis à basse température et de l'ensemble de la machine, etc.
Les étapes spécifiques pour extraire la chlorophylle par concassage cellulaire par ultrasons à l’aide d’un broyeur cellulaire à ultrasons :
1. Centrifugez ou filtrez l'échantillon d'eau et installez une membrane filtrante en fibre d'acétate sur le filtre d'aspiration. Versez un volume quantitatif d'échantillon d'eau pour la filtration, et la pression négative pendant la filtration ne doit pas être trop élevée (environ 50 kPa). Une fois l'échantillon d'eau prélevé, continuez à prélever pendant 1-2 minutes pour réduire l'humidité sur la membrane filtrante. Si un stockage à court terme est nécessaire pendant 1-2 jours, il peut être conservé dans un réfrigérateur ordinaire pour être congelé. Si un stockage à long terme est nécessaire (30 jours), il doit être conservé dans un réfrigérateur à basse température (-20 degrés).
2. Retirez la membrane filtrante contenant le phytoplancton et séchez-la à basse température au réfrigérateur pendant 6-8 heures. Coupez-le en petits morceaux avec des ciseaux et placez-le dans un tube à centrifuger de 5 ml ou 10 ml. Ajouter 3-4 ml d’acétone à 90 % pour immerger les fragments sous le niveau du liquide. Placez les fragments dans un récipient à ultrasons et utilisez des ondes ultrasonores pour briser les cellules de l'échantillon. (Comparaison des expériences à différents moments et fréquences pour faciliter l'identification du * temps et fréquence de fragmentation pour des méthodes unifiées).
3. Centrifuger l'échantillon soumis à la fragmentation cellulaire par ultrasons à l'aide d'une centrifugeuse (3000-4000r/min) pendant 10 minutes. Versez le surnageant dans une fiole jaugée de 5 ml ou 10 ml. Diluer à 5 ml ou 10 ml avec de l'acétone à 90 % et bien agiter.
4. Placez le surnageant sur un spectrophotomètre et utilisez une assiette colorimétrique à trajet optique de 1 cm pour lire les valeurs d'absorbance aux longueurs d'onde de 750 nm, 663 nm, 645 nm et 630 nm, respectivement. Utilisez de l'acétone à 90 % comme mesure d'absorbance à blanc pour corriger l'absorbance de l'échantillon.